號(hào)外號(hào)外——科佰重磅推出IHC參考品

發(fā)布時(shí)間:2024/09/06分類:技術(shù)文章來源:科佰生物

背景

Claudin18.2(CLDN18.2)是Claudin蛋白質(zhì)家族的一員，位于細(xì)胞膜表面，正常情況下僅低水平表達(dá)于胃粘膜分化上皮細(xì)胞，但在病理狀態(tài)下，Claudin18.2在多種腫瘤中有的表達(dá)顯著上調(diào)，包括80%的胃腸道腺瘤、60%的胰腺腫瘤。此外，CLDN 18.2活化還可見于食管癌、卵巢癌和肺腺癌中，因此是具有潛力治療癌癥的熱門靶點(diǎn)。目前被批準(zhǔn)進(jìn)入臨床試驗(yàn)的靶向藥物主要有四類：?jiǎn)慰寺】贵w、ADC、CAR-T和雙特異性抗體(BsAb)，靶向Claudin18.2單抗、ADC、BsAb和CAR-T療法主要以IHC篩查腫瘤Claudin18.2陽性/高表達(dá)患者為基礎(chǔ)。目前的多項(xiàng)臨床試驗(yàn)結(jié)果提示靶向Claudin18.2療法對(duì)IHC檢測(cè)Claudin18.2陽性率更高的癌癥患者亞群療效更好。

目前Claudin18.2的檢測(cè)沒有判讀金標(biāo)準(zhǔn)，其判讀標(biāo)準(zhǔn)在不同的研究中各有不同。由于Zolbetuximab是唯一進(jìn)入III期臨床的藥物，很多藥物參考它的陽性結(jié)果作為入組標(biāo)準(zhǔn)。

①判斷CLDN18.2蛋白在腫瘤細(xì)胞膜染色的強(qiáng)度，以及完整、基底外側(cè)或外側(cè)膜染色的癌細(xì)胞百分比。

②CLDN18.2陽性：在≥40%的腫瘤細(xì)胞中，任何染色強(qiáng)度為2+或3+(總數(shù))的腫瘤。

因此，通過IHC精準(zhǔn)地篩查Claudin18.2表達(dá)，對(duì)于臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性以及精準(zhǔn)醫(yī)療的有效性是至關(guān)重要的。

實(shí)驗(yàn)流程

自20 世紀(jì)中開始，免疫組織化學(xué)（immunohistochemistry，IHC）技術(shù)開始登上了臨床病理診斷的舞臺(tái)。如今，IHC檢測(cè)已經(jīng)成為一種必不可少的技術(shù)手段，在病理診斷中扮演著重要的角色，尤其體現(xiàn)在腫瘤的診斷中。然而，IHC 方法猶如一把雙刃劍，如果因?yàn)橘|(zhì)控不合格，會(huì)造成假陽性或假陰性而導(dǎo)致病理的誤診和漏診，給予臨床錯(cuò)誤的信息，最終耽誤患者的治療而造成嚴(yán)重后果。因此，在免疫組化染色過程中設(shè)立對(duì)照是進(jìn)行染色質(zhì)量控制的最重要的措施之一，尤其是陰性和陽性對(duì)照。

在2014和2015年，國(guó)際特設(shè)專家委員會(huì)對(duì)診斷免疫組化對(duì)照的分類及標(biāo)準(zhǔn)定義、陰性對(duì)照結(jié)果判讀及選擇應(yīng)用等方面提出專家推薦意見。

基于目前的IHC在臨床病理診斷中的重要作用，建立科學(xué)規(guī)范、精細(xì)化的免疫組化質(zhì)量控制體系就顯得尤為重要。良好的免疫組化染色切片是正確判斷染色結(jié)果的基礎(chǔ)和前提。由于免疫組化染色過程中存在很多步驟或環(huán)節(jié)，每一個(gè)步驟或環(huán)節(jié)都可能影響到染色的最終結(jié)果。

科佰生物選擇了CLDN18.2作為研究對(duì)象，重磅推出蠟塊和撈片兩款標(biāo)準(zhǔn)品。

科佰生物

針對(duì)IHC過程的質(zhì)控，科佰現(xiàn)推出IHC標(biāo)準(zhǔn)品：

IHC是依據(jù)抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原，對(duì)其進(jìn)行定位、定性及相對(duì)定量的研究。IHC 全流程質(zhì)控包括了檢測(cè)前的準(zhǔn)備、實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過程、檢測(cè)后結(jié)果的判讀三部分。其中的每個(gè)細(xì)節(jié)都可能會(huì)影響到IHC 染色質(zhì)量。針對(duì)這3個(gè)部分，科佰做了充分的質(zhì)量控制。

1、針對(duì)檢測(cè)前的質(zhì)量控制：

一個(gè)好的IHC對(duì)照，細(xì)胞的Claudin18.2表達(dá)量非常重要?？瓢鄄捎肍ACS檢測(cè)Claudin18.2蛋白的表達(dá)，選擇了不同表達(dá)量的細(xì)胞作為樣本。

2、針對(duì)檢測(cè)中和檢測(cè)后的質(zhì)量控制：

IHC的核心原理就是抗原抗體的特異性反應(yīng)，因此一個(gè)優(yōu)質(zhì)的抗體是保證檢測(cè)結(jié)果的重要因素，科佰選用Anti-Claudin18.2 antibody
[EPR19202] (ab222512)，該抗體為藥企/診斷公司開發(fā)相應(yīng)的（伴隨）診斷/檢測(cè)試劑提供了重要參考，報(bào)告涵蓋結(jié)腸癌、胃癌、胰腺癌、食管癌各超過100例樣本。免疫組化試劑盒選用servicebio (G1215)，該試劑盒為高靈敏度的兩步法免疫組化試劑盒。

在檢測(cè)后的IHC結(jié)果判讀，科佰參考免疫組化判讀標(biāo)準(zhǔn)將IHC結(jié)果分類：

無著色或≤10%的浸潤(rùn)癌細(xì)胞呈現(xiàn)不完整的、微弱的細(xì)胞膜染色為陰性(0)；

>10%的浸潤(rùn)癌細(xì)胞呈現(xiàn)不完整的、微弱的細(xì)胞膜染色為陰性(1＋)；

>10%的浸潤(rùn)癌細(xì)胞呈現(xiàn)不完整的和/或弱～中等強(qiáng)度的細(xì)胞膜染色，或≤10%的浸潤(rùn)癌細(xì)胞呈現(xiàn)強(qiáng)而完整的細(xì)胞膜染色為不確定(2＋)；

>10%的浸潤(rùn)癌細(xì)胞呈現(xiàn)強(qiáng)、完整、均勻的細(xì)胞膜染色為陽性(3＋)

免疫組化檢測(cè)過程中存在一定的假陽性，假陰性，同一組織相同抗原在不同批次實(shí)驗(yàn)中的結(jié)果可能存在差異，科佰推出的IHC標(biāo)準(zhǔn)品，可以評(píng)估實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性以及合理性，提高免疫組化檢測(cè)的準(zhǔn)確性，用于篩選Claudin18.2陽性表達(dá)，服務(wù)于靶向Claudin18.2治療。