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慢病毒整合標(biāo)準(zhǔn)品

背景

      嵌合抗原受體T細(xì)胞（Chimeric antigen receptor Tcell, CAR-T）免疫療法是將應(yīng)用基因修飾技術(shù)制備表達(dá)，嵌合抗原受體(Chimeric antigen receptor, CAR)的T淋巴細(xì)胞，經(jīng)體外擴(kuò)增后再回輸至患者體內(nèi)的一種個(gè)體化治療方法。 近年來，隨著Kymriah,  Yescarta 以及 Strimvelis等細(xì)胞治療產(chǎn)品陸續(xù)推上市場，慢病毒作為細(xì)胞裝載CAR過程的關(guān)鍵中間載體，確保慢病毒為基礎(chǔ)的藥物質(zhì)量和安全性挑戰(zhàn)巨大。去年年底FDA公布調(diào)查CAR-T療法的安全性問題—T細(xì)胞癌癥風(fēng)險(xiǎn)的出現(xiàn)被認(rèn)為源于其使用的基因遞送載體-慢病毒載體后，于今年1月31日正式發(fā)布“ Considerations for the development of Chimeric Antigen Receptor (CAR) T Cell Products”指導(dǎo)原則。當(dāng)中建議根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)評估來確定載體拷貝數(shù)（VCN）的放行標(biāo)準(zhǔn)。風(fēng)險(xiǎn)評估包括插入位點(diǎn)分析、克隆優(yōu)勢、劑量、適應(yīng)癥、研究人群等研究支持的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。國家藥品監(jiān)督管理局藥品審批中心（CDE）發(fā)布的《基因修飾細(xì)胞治療產(chǎn)品非臨床研究與技術(shù)指導(dǎo)原則》也將“插入突變風(fēng)險(xiǎn)評估”作為非臨床安全性研究的內(nèi)容，并詳細(xì)規(guī)定關(guān)鍵風(fēng)險(xiǎn)因素的評估要點(diǎn)，因此CAR-T治療需要評估潛在的插入突變風(fēng)險(xiǎn)和致癌性風(fēng)險(xiǎn)。
 


慢病毒整合位點(diǎn)檢測方法

      目前檢測慢病毒整合位點(diǎn)的主要平臺為高深度測序（NGS)。   
 

     
      綜合考慮，科佰選擇多種方法（捕獲探針法測序+ sanger + ddPCR）驗(yàn)證，充分驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)品的準(zhǔn)確性。在驗(yàn)證過程中，捕獲探針法測序技術(shù)針對慢病毒整合位點(diǎn)檢測的準(zhǔn)確性得到了很好的驗(yàn)證。


慢病毒整合位點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)品

      我國在2021年連續(xù)出臺了4部基因治療相關(guān)產(chǎn)品的指導(dǎo)原則都指出慢病毒整合檢測至少要包含1. 整合方向 2. 整合位置 3. 特定整合位置和整合方向的絕對克隆數(shù)目。

      針對這一要求，科佰現(xiàn)推出慢病毒整合位點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)品。
 
根據(jù)NGS（捕獲探針法測序）結(jié)果確定慢病毒插入位點(diǎn)，通過Sanger測序以及ddPCR法再次驗(yàn)證，準(zhǔn)確定位慢病毒插入位點(diǎn)以及整合頻率。
 
CAR-T細(xì)胞療法被認(rèn)為是最有前途的癌癥治療方法之一，其在血液系統(tǒng)瘤中的運(yùn)用已取得了優(yōu)異的療效，可靠的檢測方法可以準(zhǔn)確有效分析慢病毒插入位點(diǎn)，協(xié)助客戶評估插入突變的可能性以及相關(guān)的風(fēng)險(xiǎn)，提高細(xì)胞免疫治療的安全性。
 


慢病毒整合位點(diǎn)檢測服務(wù)

      科佰現(xiàn)推出針對慢病毒整合位點(diǎn)檢測服務(wù)（捕獲探針法測序技術(shù)）。捕獲探針法測序技術(shù)主要是針對LTR區(qū)域做探針捕獲，PCR后，NGS測序驗(yàn)證，結(jié)合生信分析方法，判斷慢病毒插入位點(diǎn)。后續(xù)同時(shí)采用了sanger以及ddPCR方法對NGS(捕獲探針法測序)技術(shù)進(jìn)行了驗(yàn)證，NGS(捕獲探針法測序)檢測出的位點(diǎn)，sanger以及ddPCR方法均檢出。 
 


      慢病毒插入位點(diǎn)檢測服務(wù)（捕獲探針法測序）可以協(xié)助您準(zhǔn)確定位慢病毒插入位點(diǎn)，慢病毒整合位點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)品不僅可以適用于多種檢測方法，協(xié)助您判斷方法的準(zhǔn)確性，還可以用于定位檢測方法的檢測限。


科佰生物

      科佰生物推出慢病毒整合位點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)品以及慢病毒插入位點(diǎn)檢測服務(wù)（捕獲探針法測序）。“產(chǎn)品+技術(shù)服務(wù)”，總有一款適合你！
 
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